建立一个新的PCR反应，需要优化其反应条件以获得最适反应条件。
需要优化的PCR反应条件包括
- A、模板量和纯度
- B、引物浓度
- C、DNA聚合酶浓度
- D、dUTP浓度
- E、Mg2+浓度
- F、扩增条件，包括变性、复性、延伸的温度和时间等
退火温度是决定PCR反应特异性的关键因素，通常退火温度为
- A、Tm
- B、Tm减3℃
- C、Tm减5℃
- D、Tm减10℃
- E、Tm加3℃
- F、Tm加5℃
在一定范围内降低退火温度有以下哪些作用
- A、减少引物与靶DNA的错配，提高反应的特异性
- B、减少反应的产物量
- C、有利于引物和模板的复性
- D、容易导致引物与靶DNA的错配，增加非特异性反应
- E、提高PCR反应的重复性
- F、降低PCR反应的灵敏度
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