医学临床三基(医技)

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试述蛋白质双向凝胶电泳原理。

正确答案:双向凝胶电泳(two-DimEnsionAl ElECtrophosis,2-DE)技术是临床蛋白质组学研究中的重要工具之一,是目前唯一可在一块凝胶上同时分离成千上万个蛋白质组分的方法。其基本原理是根据蛋白质不同分子间等电点及相对分子质量不同,通过一相的SDS-PAGE和二相的等电聚焦电泳来分离复杂的蛋白质混合物。其优点在于可以同时分离大量蛋白质,应用大面积胶条,一次可鉴定近10000个蛋白质点;可通过蛋白质点染色的强度对其进行定量分析;也可提供蛋白质翻译后修饰信息,对具有不同程度的糖基化或磷酸化修饰的蛋白质亚型能较容易地进行分离。目前,已有5000多种蛋白质成分采用2-DE技术得到很好分离。在血清中,应用2-DE可分辨出100多种血清蛋白,其高度分辨率是各种类型单向PAGE及其他电泳所无法比拟的,因此广泛用于生物大分子的分离和精确分析。
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