医学临床三基(医技)

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交叉配血试验

正确答案:(一)低离子聚凝胺法 【操作】 (1)主(次)侧管加入受(供)血者血清2滴,加供(受)血者4%红细胞盐水悬液1滴。 (2)各管加低离子介质液0.8mL,混匀,静置1分钟;各管加聚凝胺溶液1滴,混匀,1000r/min离心1分钟或3000r/min离心15秒,倒出上清液(残留约0.1mL),扣摇,肉眼可见明显的凝集状(如无凝集须重做);加假凝集清涂液1滴于管底,轻摇,凝集1分钟内消失呈均匀混悬液,为阴性;凝集1分钟内不能被消除,即为阳性。 (3)结论:阳性表示受(供)血者血清中含供(受)者红细胞血型抗原相应的血型抗体(IGG、IGM),供受血者不相容。阴性表示供受血者相容。 【注意事项】 (1)聚凝胺试剂,按说明书操作。 (2)加入假凝集清涂液后,应尽快观察结果(不可超过1分钟),以免反应消失。 (3)聚凝胺是一种抗肝素药物,所以使用含肝素标本,要加大聚凝胺量以中和肝素。 (4)加标本时应先加血清,后加红细胞悬液。 (5)吸取病人与供血者标本不能使用同一支吸管。 (6)如多个供血者与同一病人配血,应在试管上写明病人和供血者姓名以及标本性质(血清或红细胞悬液)。 (7)报告应写明"病人×××(×型)血清与供血者×××(×型)红细胞( )凝集、( )溶血。供血者×××(×)型血清与病人×××(×型)红细胞( )凝集、( )溶血"。复检者与配血者应签全名,写明收标本和发报告的日期、时间。 (8)注意与冷凝集、假凝集等的鉴别。 【提问】 1.进行交叉配血时,对病人血样有什么要求? 要求病人血液样品是输血前3天以内、冷藏且无污染无溶血者。反复输血的病人更应抽取新鲜样品进行配血试验。 2.可否用血浆作交叉配血? 因为用血浆交叉配血时,纤维蛋白原可对试验带来干扰,故一般主张用血清。如必要抗凝,则应用EDTA抗凝剂。 3.交叉配血试验在操作上最容易出现的错误有哪些? (1)不是"交叉",而是在同一试管内加同一样品的血清和红细胞。 (2)忘记加血清,所以操作时应特别注意先加血清,后加红细胞这个程序。 (3)使用同一支吸管吸病人和供血者样品。 (4)离心的转速和时间未严格控制。 (5)未用显微镜观察结果或细小凝集被忽视,或忽视了轻微溶血现象。 4.交叉配血生理盐水介质立即离心法有何缺点?如何解决? 以生理盐水为介质的立即离心法能检出ABO血型不配合的完全抗体,而不相配合的红细胞血型不完全抗体则不能发现。除ABO血型系统以外的其他很多血型系统的抗体、多次接受输血病人及多次妊娠妇女产生的抗体绝大多数为IGG抗体,此类抗体在盐水介质中不能凝集相应红细胞。为输血安全,必须改进配血方法,以检出不完全抗体,习惯上可采用抗球蛋白法、蛋白酶法及胶体介质法,这些方法也存在一些缺点,目前应用较多的是聚凝胺法,可以同时检出IGM和IGG两种血型抗体,能发现引起溶血性输血反应的几乎所有规则及不规则抗体。有条件者,可采用微柱凝胶法。 5.交叉配血试验后血标本应如何保存?为什么? 受血者和供血者血标本在输血后应置于2℃~6℃保存7天,以便对输血不良反应追查原因。 (二)微柱凝胶法 【操作】 1.撕开配血卡密封纸,编号。 2.用低离子介质液配制0.8%供血者和受血者红细胞悬液。 3.单号管中(主侧)加入0.8%供血者红细胞悬液50μL和受血者血清25μL。 4.双号管中(次侧)加入0.8%受血者红细胞悬液50μL和供血者血清25μL。 5.置专用孵育箱37℃孵育15分钟。 6.置专用离心机离心10分钟。 7.判断结果,同ABO血型鉴定。 【注意事项】 1.操作过程中须先加红细胞悬液再加血清。 2.反应卡封口有损坏,管中干涸,或有气泡时,不可使用。 3.一张卡可以配血3个,要有计划地根据需要撕开密封纸,以免浪费,并一定做好标记。 4.细胞浓度要在0.8%~1%,不可太浓太稀。 5.纤维蛋白可吸附部分红细胞,导致假阳性结果,故应将标本离心。 6.某些药物、疾病可导致假阳性结果。 7.细菌及异常血清蛋白可影响结果。 【提问】 1.微柱凝集卡有几种类型? 有3种类型,分别作不同的血型血清学检验。 (1)中性凝胶不含抗体,可用于检测IGM类血型抗体和血型抗原的反应,如ABO正反定型。 (2)特异性凝胶含特异性血型抗体,可用于检测血型抗原。 (3)抗球蛋白凝胶含球蛋白抗体,可用于检测IGG不完全抗体和相应红细胞血型抗原的反应,如交叉配血、不规则抗体筛查和鉴定以及应用抗D血清检查D血型等。 2.用微柱凝胶法作交叉配血试验有何特点? 微柱凝胶中含有抗球蛋白试剂,不仅能检测IGM类血型抗体,更能检测IGG类血型抗体。操作简单,程序标准,灵敏度高。 用本法实际上是传统的盐水介质法加抗球蛋白试验。特别是传统的抗球蛋白试验反复洗涤,步骤复杂,需要时间长,而微柱凝胶法克服了原法的缺点,更快捷、准确。 3.使用微柱凝胶卡需要什么离心机? 需要水平转子离心机。因水平转子离心机和凝胶微柱中的红细胞离心力是同一方向(同轴线),这样,红细胞血型抗原抗体特异性结合的凝集复合物不会偏向凝胶表面一侧或胶中一侧;如为阴性结果,红细胞也不会偏向管底之一侧,而沉淀于凝胶管底之尖部。而角转子离心机,由于其离心力和凝胶微柱中红细胞离心力轴向不一致,可能造成凝集复合物偏向管的一侧,特别是阴性结果的红细胞将位于管底一侧,而不是管底尖部,易形成弱阳性假象。
答案解析:
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