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临床医学检验临床化学技术(副高)[058]

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PCR引物设计的原则包括

  • A、引物长度以18~25个核苷酸为宜
  • B、5端的第一、二个碱基影响Taq DNA聚合酶的延伸效率,与模板应严格配对
  • C、3端可加修饰成分,如酶切位点、生物素标记等,便于产物分析和克隆等
  • D、通常位于基因组DNA的高度保守区,最好跨越两个外显子
  • E、GC含量以45%~55%为宜
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