PCR引物设计的原则包括

• A、引物长度以18～25个核苷酸为宜
• B、5端的第一、二个碱基影响Taq DNA聚合酶的延伸效率，与模板应严格配对
• C、3端可加修饰成分，如酶切位点、生物素标记等，便于产物分析和克隆等
• D、通常位于基因组DNA的高度保守区，最好跨越两个外显子
• E、GC含量以45%～55%为宜