医院消毒效果
正确答案:一、采样的原则与要求
（一）采样时应注意无菌操作 采样人员应做好个人防护，并按无菌技术操作，防止人员、标本和环境的污染；并正确处理采样及污染的废弃物。
（二）样品的采取和送检 注意样品采取的正确时段，并将采取的样品在6小时内送实验室检测，若样品保存于0～4℃条件时，送检时间不得超过24小时。
（三）样品标识 应对采取的样品进行唯一性标记，在样本上注明样品编号，并附详细的采样单，注明样品编号、样品名称、采样地点、采样时间、单位名称、来源、数量、检测项目和采样人信息。
二、采样器材和采样液
常用的采样工具主要包括：含营养琼脂平板(直径为9cm)、10ml磷酸盐缓冲液采样管、含0.1%硫代硫酸钠10ml磷酸盐缓冲液采样管、含3%(w／v)吐温80和0.3%卵磷脂10ml磷酸盐缓冲液采样管、含0.3%甘氨酸10ml磷酸盐缓冲液采样管、9ml普通营养肉汤采样管、含0.1%硫代硫酸钠9ml营养肉汤采样管、含3%(w/v)吐温80和0.3%卵磷脂9ml营养肉汤采样管、含0.3%甘氨酸9ml营养肉汤采样管，灭菌规格板(5cm×5cm)、无菌镊子、酒精灯、快速手消毒剂、无菌棉签、一次性使用无菌注射器(5ml)。
三、样本采取方法
（一）各类环境空气、物体表面分类 ⅰ类环境：采用空气洁净技术的诊疗场所、分洁净手术部和其他洁净场所；
ⅱ类环境：包括非洁净手术部（室）、产房、导管室、血液病病区、烧伤病区等保护性隔离病区；重症监护病区；新生儿室等；
ⅲ类环境：包括母婴同室、消毒供应中心的检查包装灭菌区和无菌物品存放区、血液透析中心（室）、其他普通住院病区等。
ⅳ类环境：包括普通门（急）诊及其检查、治疗（注射、换药等）室；感染性疾病科门诊和病区。
（二）空气
1．采样时段 ⅰ类环境在洁净系统自净后与从事医疗活动前采样；ⅱ、ⅲ、ⅳ类环境在消毒或规定的通风换气后与从事医疗活动前采样。
2．采样方法
(1)ⅰ类环境可选择平板暴露法或空气采样器法，按照gb50333《医院洁净手术部建筑技术规范》要求进行检测。空气采样器法可选择六级撞击式空气采样器或其他经过验证的空气采样器。检测时将采样器置于室内中央80～150cm高度，按采样器使用说明书操作，每次采样时间不应超过30分钟。房间大于10m
者，每增加10m增设一个采样点。
(2)ⅱ、ⅲ和ⅳ类环境采用平板暴露法，室内面积≤30m，设内、中、外对角线3点，内、外点应距墙壁1m处；室内面积>30m，设4角及中央5点，4角的布点部位应距墙壁1m处。采样方法：将普通营养琼脂平板(ф90mm)放置各采样点，采样高度为距地面80～150cm；采样时将平板盖打开，并将平板盖平移扣放于平板底上边边缘，平板盖不能遮挡普通营养琼脂，暴露至规定时间（ⅱ类环境暴露15分钟，ⅲ、ⅳ类环境暴露5分钟）后，盖上盖及时送检。
(3)注意事项
1)采样前，关好门、窗，在无人走动的情况下，静止10分钟后进行采样。
2)采样高度选择与地面垂直高度80～150cm。
3)行走时动作要轻，且尽可能少在室内走动。
4)先布点（放平板），后开盖。
5)同一房间的空气与物表采样，均由一人操作。
（三）医务人员手
1．采样时段 在医院工作人员清洗消毒双手后，接触病人或从事医疗活动前采样。
2．采样方法 将浸有无菌0.03mol／l磷酸盐缓冲液或生理盐水采样液的一支棉拭子在双手指曲面从指跟到指端来回涂擦各两次（一只手涂擦面积约30cm），并随之转动采样棉拭子，剪去手接触部位，将棉拭子放入装有10ml采样液的试管内编号送检。采样面积按平方厘米(cm)计算。工作人员用消毒剂消毒双手后，手上残留有消毒剂，应用含有与消毒液相对应的中和剂的采样液采样。
3．注意事项 采样必须在工作人员手清洗消毒后，进行医疗活动前，采取两只手为一个样品。
（四）物体表面
1．采样时段 潜在污染区、污染区消毒后采样。清洁区根据现场情况确定。
2．采样面积 物体被采表面<100cm，取全部表面；被采表面≥100cm，采取100cm。
3．样品采样方法 用5cm×5cm灭菌规格板放在被检物体表面，用浸有无菌0.03mol／l磷酸盐缓冲液或生理盐水采样液的1支棉拭子，在规格板内横竖往返各涂抹5次，并随之转动棉拭子，连续采4个规格板，剪去手接触部分，将棉拭子放入装有10ml采样液的试管中送检。门把手等小型物体则采用浸有无菌0.03mol／l磷酸盐缓冲液或生理盐水采样液的棉拭子涂擦物体表面采样。若采样物体表面有残留的消毒剂时，应用含与消毒液相对应的中和剂的采样液采样。
4．注意事项
(1)门把手等不规则物体表面用棉拭子涂擦采样，菌落总数是用cfu/件表示。
(2)同一房间空气、物体表面的采样，应先采空气，后采物体表面，最好由一个人操作。
(3)物体表面的采样应由近及远，兼顾上下中左右。
（五）医疗用品
1．采样时段 在消毒或灭菌处理后，存放有效期内采样。
2．采样方法 样品采取应在100级洁净实验室内进行。
(1)灭菌的医疗器材
1)可用破坏性方法采取的灭菌医疗器材；如一次性输液（血）器、注射器和注射针等参照《中华人民共和国药典》中的无菌检查法进行。
2)对不能用破坏性方法采取的医疗器材：缝合针、针头、手术刀片等医疗器械各5件，分别投入5ml的无菌洗脱液中；注射器则取5副在5ml无菌肉汤中分别抽吸5次；手术钳、镊子等大的医疗器械取2件，用棉拭子涂擦采样，将棉拭子投入5ml无菌洗脱液中，被采表面<100cm，取全部表面，被采表面≥100cm
，取100cm。然后将除去手接触部分的棉拭子进行无菌检查。
3)牙科手机样品，将每支手机分别置于含20m1～25ml采样液的无菌大试管(内径25mm)中，液面高度应大于4．0cm，于旋涡混合器上洗涤振荡30秒以上，取洗脱液进行无菌检查。
(2)消毒医疗器材
1)可整件放入无菌试管的灭菌物品，用洗脱液浸没后震荡30秒以上，取洗脱液1.0ml接种于灭菌的平板，将冷至40～45℃的熔化营养琼脂培养基，每个平板倾注15～20ml营养琼脂培养基，冷至室温将平板翻过来，置36℃±1℃恒温箱培养48小时，计数菌落数（单位cfu/件），必要时分离致病性微生物。
2)可用破坏性方法采取的消毒医疗器材，在100级超净工作台称取1～10g样品，放入装有10ml采样液的试管内进行洗脱，取洗脱液1.0ml接种灭菌的平板，计数菌落数(cfu/g)，必要时分离致病性微生物；对不能用破坏性方法取样的医疗器材，在100级超净工作台，用浸有无菌生理盐水采样液的棉拭子在被检物体表面涂抹采样，被采表面<100cm，取全部表面，被采表面≥100cm，取100cm。
3)消毒后内镜，取清洗消毒后内镜，采用无菌注射器抽取50ml含与消毒剂相应中和剂的洗脱液，从内镜的活检入口注入冲洗内镜管路，并全量收集（可使用蠕动泵）送检。
3．注意事项
(1)在洁净度100级区域中进行，应严格遵守无菌操作，避免微生物污染。
(2)当消毒因子为消毒剂时，采样液中应加入与消毒剂相应的中和剂。
(3)应采有效期内的样品（高压灭菌-2周；环氧乙烷-2年）。
（六）消毒剂
1．采样要求
(1)采样时间，采取更换前使用中消毒液与无菌器械保存液。
(2)消毒剂采样分库存消毒剂和使用中消毒液。
2．采样方法 在无菌条件下，用无菌吸管吸取1ml被检样液，加入9ml含相应的稀释液中混匀。对于醇类与酚类消毒剂，稀释液用普通营养肉汤即可；对于含氯消毒剂、含碘消毒剂、过氧化物消毒剂，需用含0.1%硫代硫酸钠磷酸缓冲液；对于洗必泰、季铵盐消毒剂，需用含3%(w/v)吐温80和0.3%卵磷脂磷酸缓冲液；对于醛类消毒剂，需用含0.3%甘氨酸磷酸缓冲液；对于含有表面活性剂的各种复方消毒剂，需用含3%(w／v)吐温8磷酸缓冲液，也可使用该消毒剂消毒效果检测的中和剂鉴定试验确定的中和剂，以中和被检样液的残效作用。
3．注意事项
(1)采集消毒液样品时应在消毒液内没有物品或放入物品消毒作用到规定时间之后进行采样。
(2)采样后1小时内检测，实际工作中由于各种原因做不到，因此，我们加入9ml与所采消毒剂相对应的中和剂中和其消毒作用，带回实验室后及时检测。
(3)不同消毒剂使用与之相对应的中和剂中和，以中和被检消毒液的残效作用。
者，每增加10m增设一个采样点。
(2)ⅱ、ⅲ和ⅳ类环境采用平板暴露法，室内面积≤30m，设内、中、外对角线3点，内、外点应距墙壁1m处；室内面积>30m，设4角及中央5点，4角的布点部位应距墙壁1m处。采样方法：将普通营养琼脂平板(ф90mm)放置各采样点，采样高度为距地面80～150cm；采样时将平板盖打开，并将平板盖平移扣放于平板底上边边缘，平板盖不能遮挡普通营养琼脂，暴露至规定时间（ⅱ类环境暴露15分钟，ⅲ、ⅳ类环境暴露5分钟）后，盖上盖及时送检。
(3)注意事项
1)采样前，关好门、窗，在无人走动的情况下，静止10分钟后进行采样。
2)采样高度选择与地面垂直高度80～150cm。
3)行走时动作要轻，且尽可能少在室内走动。
4)先布点（放平板），后开盖。
5)同一房间的空气与物表采样，均由一人操作。
（三）医务人员手
1．采样时段 在医院工作人员清洗消毒双手后，接触病人或从事医疗活动前采样。
2．采样方法 将浸有无菌0.03mol／l磷酸盐缓冲液或生理盐水采样液的一支棉拭子在双手指曲面从指跟到指端来回涂擦各两次（一只手涂擦面积约30cm），并随之转动采样棉拭子，剪去手接触部位，将棉拭子放入装有10ml采样液的试管内编号送检。采样面积按平方厘米(cm)计算。工作人员用消毒剂消毒双手后，手上残留有消毒剂，应用含有与消毒液相对应的中和剂的采样液采样。
3．注意事项 采样必须在工作人员手清洗消毒后，进行医疗活动前，采取两只手为一个样品。
（四）物体表面
1．采样时段 潜在污染区、污染区消毒后采样。清洁区根据现场情况确定。
2．采样面积 物体被采表面<100cm，取全部表面；被采表面≥100cm，采取100cm。
3．样品采样方法 用5cm×5cm灭菌规格板放在被检物体表面，用浸有无菌0.03mol／l磷酸盐缓冲液或生理盐水采样液的1支棉拭子，在规格板内横竖往返各涂抹5次，并随之转动棉拭子，连续采4个规格板，剪去手接触部分，将棉拭子放入装有10ml采样液的试管中送检。门把手等小型物体则采用浸有无菌0.03mol／l磷酸盐缓冲液或生理盐水采样液的棉拭子涂擦物体表面采样。若采样物体表面有残留的消毒剂时，应用含与消毒液相对应的中和剂的采样液采样。
4．注意事项
(1)门把手等不规则物体表面用棉拭子涂擦采样，菌落总数是用cfu/件表示。
(2)同一房间空气、物体表面的采样，应先采空气，后采物体表面，最好由一个人操作。
(3)物体表面的采样应由近及远，兼顾上下中左右。
（五）医疗用品
1．采样时段 在消毒或灭菌处理后，存放有效期内采样。
2．采样方法 样品采取应在100级洁净实验室内进行。
(1)灭菌的医疗器材
1)可用破坏性方法采取的灭菌医疗器材；如一次性输液（血）器、注射器和注射针等参照《中华人民共和国药典》中的无菌检查法进行。
2)对不能用破坏性方法采取的医疗器材：缝合针、针头、手术刀片等医疗器械各5件，分别投入5ml的无菌洗脱液中；注射器则取5副在5ml无菌肉汤中分别抽吸5次；手术钳、镊子等大的医疗器械取2件，用棉拭子涂擦采样，将棉拭子投入5ml无菌洗脱液中，被采表面<100cm，取全部表面，被采表面≥100cm，取100cm。然后将除去手接触部分的棉拭子进行无菌检查。
3)牙科手机样品，将每支手机分别置于含20m1～25ml采样液的无菌大试管(内径25mm)中，液面高度应大于4．0cm，于旋涡混合器上洗涤振荡30秒以上，取洗脱液进行无菌检查。
(2)消毒医疗器材
1)可整件放入无菌试管的灭菌物品，用洗脱液浸没后震荡30秒以上，取洗脱液1.0ml接种于灭菌的平板，将冷至40～45℃的熔化营养琼脂培养基，每个平板倾注15～20ml营养琼脂培养基，冷至室温将平板翻过来，置36℃±1℃恒温箱培养48小时，计数菌落数（单位cfu/件），必要时分离致病性微生物。
2)可用破坏性方法采取的消毒医疗器材，在100级超净工作台称取1～10g样品，放入装有10ml采样液的试管内进行洗脱，取洗脱液1.0ml接种灭菌的平板，计数菌落数(cfu/g)，必要时分离致病性微生物；对不能用破坏性方法取样的医疗器材，在100级超净工作台，用浸有无菌生理盐水采样液的棉拭子在被检物体表面涂抹采样，被采表面<100cm，取全部表面，被采表面≥100cm，取100cm。
3)消毒后内镜，取清洗消毒后内镜，采用无菌注射器抽取50ml含与消毒剂相应中和剂的洗脱液，从内镜的活检入口注入冲洗内镜管路，并全量收集（可使用蠕动泵）送检。
3．注意事项
(1)在洁净度100级区域中进行，应严格遵守无菌操作，避免微生物污染。
(2)当消毒因子为消毒剂时，采样液中应加入与消毒剂相应的中和剂。
(3)应采有效期内的样品（高压灭菌-2周；环氧乙烷-2年）。
（六）消毒剂
1．采样要求
(1)采样时间，采取更换前使用中消毒液与无菌器械保存液。
(2)消毒剂采样分库存消毒剂和使用中消毒液。
2．采样方法 在无菌条件下，用无菌吸管吸取1ml被检样液，加入9ml含相应的稀释液中混匀。对于醇类与酚类消毒剂，稀释液用普通营养肉汤即可；对于含氯消毒剂、含碘消毒剂、过氧化物消毒剂，需用含0.1%硫代硫酸钠磷酸缓冲液；对于洗必泰、季铵盐消毒剂，需用含3%(w/v)吐温80和0.3%卵磷脂磷酸缓冲液；对于醛类消毒剂，需用含0.3%甘氨酸磷酸缓冲液；对于含有表面活性剂的各种复方消毒剂，需用含3%(w／v)吐温8磷酸缓冲液，也可使用该消毒剂消毒效果检测的中和剂鉴定试验确定的中和剂，以中和被检样液的残效作用。
3．注意事项
(1)采集消毒液样品时应在消毒液内没有物品或放入物品消毒作用到规定时间之后进行采样。
(2)采样后1小时内检测，实际工作中由于各种原因做不到，因此，我们加入9ml与所采消毒剂相对应的中和剂中和其消毒作用，带回实验室后及时检测。
(3)不同消毒剂使用与之相对应的中和剂中和，以中和被检消毒液的残效作用。
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