荧光定量PCR的引物应具有以下哪些特点

• A、引物的最适长度为20～40bp
• B、G+C含量为20%～80%，45%～55%为最佳
• C、采用SYBR GreenⅠ荧光定量PCR，PCR引物不能形成明显的引物二聚体
• D、TaqMan探针荧光定量PCR引物的T_m值应在58～60℃
• E、同一对引物的T_m值相差不超过4～5℃
• F、引物3端最后5个核苷酸应只有1～2个G/C

TaqMan探针应具有以下哪些特点

• A、探针的T_m值应比引物的T_m值高5～10℃，通常其T_m为65～72℃
• B、探针应尽可能长
• C、探针的5端不要有C
• D、探针的3端要进行封闭
• E、探针中的G不能多于C
• F、如果探针用于检测等位基因差异或突变位点，应将错配核苷酸放在探针中间

荧光定量PCR的优点包括

• A、实时监测，定量范围大
• B、繁琐费时
• C、灵敏度高
• D、准确度高
• E、大大降低了实验室污染的可能
• F、重复性好